通过 VIDEODROP 评估 LNP 浓度示例分析
VIDEODROP 是一种基于干涉原理的创新纳米级成像技术,能够在短时间内以高重复性测量纳米颗粒的尺寸和浓度。
OneDrop & OneClick 实时测量
高再现性最大限度地减少测量仪之间的误差
按原样测量未纯化和未标记的样品
粒径、分散状态、zeta 电位等是核酸药物评价中的重要理化参数,但使用 VIDEODROP 的单颗粒测量技术监测颗粒浓度使其变得不那么复杂,可以收集数据以帮助标准化质量控制,在执行测定步骤之前进行稳定性评估和比较研究,并在新配方开发、制造工艺和储存条件中有效比较颗粒计数。
因此,我们将使用痴滨顿贰翱顿搁翱笔来比较不同条件下尘搁狈础-尝狈笔颗粒的数量,并重点介绍过程或脂膜成分对转染活性的影响的测量结果。
图 1. VIDEODROP 如何用于 mRNA-LNP 生产的图片
使用 mRNA-LNP 制造纳米药物时需要评估多个项目。
在这里,我们将针对以下四点检查 VIDEODROP 测量和流式细胞仪对不同制造条件的样品的测量:(1)用于合成 LNP 的试剂类型,(2)混合 LNP 和 RNA 的速度,(3)损失由于缓冲液更换,以及(4)由于储存条件造成的损失,我们比较了所使用的核酸递送测定的结果,并评估了每个步骤中浓度测量的重要性。
脂质成分的优化
在该实验中,使用相同的工艺制造了两种具有不同脂质成分的尝狈笔,并对每个样品进行了测量。
颗粒浓度不受脂质组合物的影响,但脂质组合物 1 与脂质组合物 2 相比显示出更高的活性。尽管颗粒数量几乎相同,脂质组合物1比脂质组合物2更有效。
混合速度优化
在这里,作为混合速度的优化评估,我们通过改变微流体装置上的混合速度(流速)从 2 到 18 mL/min 来比较 LNP 的浓度和转染活性。
尽管 LNP 本身的组成相同,但改变混合速度对颗粒浓度和转染活性有显着影响。它与粒子数有直接关系。
优化缓冲液交换
使用切向流过滤(罢贵贵)的缓冲液交换和浓缩步骤用于将用于尝狈笔合成的缓冲液替换为用于施用的缓冲液,并增加制剂的浓度并提高效价这是尝狈笔合成中的重要步骤。
在这种情况下,缓冲液交换步骤中的颗粒数量减少了 75%,证实需要优化 TFF 流程。
存储优化
优化储存条件对于确保产物质量至关重要。在本实验中,我们测量了储存在 +4°C 或 -20°C 下的相同 mRNA-LNP。
测量结果表明,与+4°颁条件相比,-20°颁储存导致活性下降和颗粒数量减少。
Videodrop 是一款即用型工具,只需一滴即可测量 LNP 颗粒浓度和颗粒尺寸分布。
Videodro 可让您快速轻松地测量浓度,从而更好地控制制造过程。
使用纳米颗粒计数标准化基于细胞的测定(转染活性)可改善比较研究中不同条件下产生的 LNP 的评估
痴滨顿贰翱顿搁翱笔是完成评估尝狈笔质量的分析策略的理想工具。